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ATCC 菌株并不屬于任何公司,ATCC 是美國典型培養(yǎng)物保藏中心(American Type Culture Collection)的縮寫,它是一家成立于 1925 年的非盈利性組織。
ATCC 的主要使命是收集、保存、鑒定和分發(fā)各種生物材料,包括微生物菌株、細胞系等,為全球的科研、工業(yè)和教育領(lǐng)域提供標準參考材料。不過,ATCC 通過授權(quán)衍生物計劃(LDP)與一些商業(yè)公司合作,這些公司可以生產(chǎn)和銷售基于 ATCC 生物材料的產(chǎn)品。目前參與該計劃的公司有 Microbiologics Inc.、PML Microbiologicals、Gibson Laboratories Inc.、MEC Conti、Remel Inc. 等。

以下幾類微生物資源常用于生物肥料的研發(fā):
固氮微生物
根瘤菌:與豆科植物共生,能侵入豆科植物根部形成根瘤,將空氣中的氮氣轉(zhuǎn)化為氨,供植物吸收利用。不同的豆科植物有與之特異性共生的根瘤菌,如大豆根瘤菌與大豆共生,苜蓿根瘤菌與苜蓿共生。
自生固氮菌:能立生活在土壤中進行固氮,如圓褐固氮菌。它在土壤中能固定空氣中的氮素,同時還能產(chǎn)生生長素,促進植物的生長和發(fā)育。
聯(lián)合固氮菌:這類微生物與植物根系形成緊密的聯(lián)合關(guān)系,但不形成根瘤。例如,巴西固氮螺菌能在禾本科植物根系周圍生長并固氮,為植物提供氮素營養(yǎng)。
解磷微生物
芽孢桿菌屬:如芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等,能分泌酸性磷酸酶、植酸酶等,將土壤中難溶性的有機磷和無機磷轉(zhuǎn)化為可被植物吸收的可溶性磷。
假單胞菌屬:該屬的一些菌株具有較強的解磷能力,通過產(chǎn)生有機酸等物質(zhì)溶解土壤中的磷礦石,提高土壤磷的有效性。
解鉀微生物
硅酸鹽細菌:又稱鉀細菌,如膠質(zhì)芽孢桿菌。它能分解土壤中含鉀的礦物質(zhì),如長石、云母等,釋放出鉀離子,供植物吸收利用,同時還能產(chǎn)生一些生物活性物質(zhì),促進植物生長。
其他有益微生物
叢枝菌根真菌:能與大多數(shù)植物根系形成共生體,其菌絲可以延伸到土壤中較遠的地方,擴大植物根系的吸收范圍,幫助植物吸收更多的水分、氮、磷、鉀等養(yǎng)分,提高植物的抗逆性和抗病能力。
放線菌:一些放線菌可以產(chǎn)生抗生素和生長激素,抑制土壤中的有害微生物,促進植物生長,同時還能參與土壤中有機物的分解和轉(zhuǎn)化,改善土壤結(jié)構(gòu)。

使用 - 80℃冰箱保存 ATCC 菌株時,需要注意以下幾個方面的問題:
菌株準備
菌液濃度:確保用于保存的菌株處于對數(shù)生長期,此時的菌株活力較強。一般來說,菌液濃度應(yīng)達到一定標準,例如對于細菌,通常要求菌液的 OD 值(光密度)在 0.6 - 0.8 左右,以有足夠數(shù)量的活菌用于長期保存。
保護劑使用:添加合適的保護劑是非常關(guān)鍵的。常用的保護劑如甘油,其終濃度一般在 15% - 30% 之間。甘油濃度過高可能會對菌株產(chǎn)生毒性,過低則不能有效保護菌株免受冷凍損傷。在添加甘油時,要確保其與菌液充分混合均勻。
凍存管選擇
材質(zhì)與質(zhì)量:應(yīng)選用、耐低溫的凍存管,通常由聚丙烯等材質(zhì)制成。的凍存管具有良好的密封性和耐低溫性能,能防止在 - 80℃環(huán)境下破裂或泄漏。
規(guī)格合適:根據(jù)菌株的量選擇合適規(guī)格的凍存管,一般常用的有 1.5 mL 或 2.0 mL 的凍存管,避免使用過大或過小的凍存管,以菌液在管內(nèi)有合適的空間,且便于凍存和復(fù)蘇操作。
冷凍過程
緩慢降溫:為了減少冰晶對菌株細胞的損傷,應(yīng)采用緩慢降溫的方式??梢詫⒀b有菌株的凍存管先放入 - 20℃冰箱中預(yù)冷 2 - 4 小時,然后再轉(zhuǎn)移至 - 80℃冰箱。也可以使用的冷凍盒,如含有異丙醇的梯度冷凍盒,它能以相對均勻的速度降溫,使菌株更好地適應(yīng)低溫環(huán)境。
避免反復(fù)凍融:盡量避免對同一管菌株進行多次凍融,因為每次凍融過程都可能對菌株造成損傷,導(dǎo)致菌株活力下降或基因突變。如果需要使用多支凍存管中的菌株,應(yīng)分別取出解凍,而不是將一支凍存管反復(fù)凍融。
冰箱維護與管理
溫度監(jiān)測:定期監(jiān)測 - 80℃冰箱的溫度,確保其溫度穩(wěn)定在 - 80℃左右,波動范圍好控制在 ±5℃以內(nèi)??梢允褂脺囟扔涗泝x或溫度計進行監(jiān)測,并做好記錄。如果發(fā)現(xiàn)溫度異常,應(yīng)及時查找原因并進行修復(fù)。
定期除霜:冰箱內(nèi)的霜層會影響制冷效果,因此需要定期除霜。除霜時應(yīng)注意避免對菌株造成影響,可以將菌株暫時轉(zhuǎn)移至其他備用的 - 80℃冰箱或液氮罐中,待除霜完成、冰箱恢復(fù)正常溫度后再放回。
空間規(guī)劃:合理規(guī)劃冰箱內(nèi)的空間,將不同類型或來源的菌株分類存放,并做好標記??梢允褂脙龃婕芑騼龃婧羞M行整理,以便于查找和取用菌株。同時,要留出一定的空間用于空氣流通,以制冷效果均勻。
記錄與標識
詳細記錄:建立詳細的菌株保存記錄,包括菌株的名稱、ATCC 編號、保存日期、保存條件、凍存管數(shù)量等信息。記錄還應(yīng)包括菌株的來源、相關(guān)的實驗記錄以及任何與菌株特性變化有關(guān)的信息,以便在需要時進行查詢和追溯。
清晰標識:在凍存管上用防水、耐低溫的標記筆清晰地標注菌株的名稱、ATCC 編號、保存日期等關(guān)鍵信息。也可以使用標簽貼紙,但要確保貼紙在低溫環(huán)境下不會脫落或模糊。此外,還可以在凍存架或凍存盒上進行標識,方便快速定位所需菌株。